本书主要介绍了分子生物学在食品领域的应用及分子生物学实验基础知识、核酸的结构与功能、核酸分离与纯化等基础知识，进而介绍了分子生物学经典技术—基因扩增检测技术和重组DNA技术相关理论知识以及酶联免疫和蛋白质分析技术。本书实践部分采用“一体式串联”法，以玉米转基因成分检测为主线，将玉米DNA提取、核酸电泳、核酸纯度检测和PCR检测转基因成分甚至荧光定量PCR测抗除草剂pat基因表达量串联起来，知识衔接紧密，提高技能学习效率。重组DNA技术类实验，将pat基因转入大肠杆菌，构建重组菌株，然后进行重组菌株的筛选、外源蛋白的表达检测等实验串联起来，作为转基因植物的上游操作实验，可以让学生很系统地掌握重组DNA技术的相关知识和操作技能，理解基因工程操作的整个过程。在本书的指导下进行教学，可实现一个学期完成一项较为完整的基因检测项目和构建出一个转基因菌株的成果。

绪论 001
一、分子生物学发展简史 001
二、分子生物学的概念和研究内容 011
三、分子生物学实验基础知识 014
知识小结 020
能力测验 020

模块一 核酸分离纯化技术 022
项目一 基因组DNA的提取与纯化 023
必备知识 023
一、DNA的结构 023
二、DNA的理化性质 026
三、DNA的提取与鉴定保存 026
技能训练 032
实训1 玉米基因组DNA的分离与纯化 032
实训2　琼脂糖凝胶电泳检测 035
知识小结 037
能力测验 038
项目二　RNA的提取与纯化 039
必备知识 039
一、RNA的结构 039
二、RNA的种类 040
三、RNA的提取 043
技能训练 046
实训3　玉米总RNA的分离与纯化 046
知识小结 049
能力测验 049
项目三　质粒的提取与纯化 051
必备知识 051
一、质粒 051
二、质粒的抽提和检测 052
技能训练 054
实训4 大肠杆菌质粒DNA的分离与纯化 054
知识小结 058
能力测验 058

模块二　基因扩增检测技术 061
项目一　聚合酶链式反应 062
必备知识 062
一、PCR技术基本原理 063
二、PCR反应体系与反应条件 064
三、PCR扩增产物分析 068
四、PCR常见问题 068
技能训练 069
实训5 PCR法检测玉米中的转基因成分 069
知识小结 073
能力测验 074
项目二　荧光定量PCR技术 075
必备知识 075
一、荧光定量PCR技术基本原理 076
二、荧光标记方式 078
三、模板的定量方式 080
四、荧光定量PCR常见问题 081
技能训练 083
实训6 荧光定量PCR法检测大豆中的转基因成分 083
知识小结 086
能力测验 087

模块三　重组DNA技术 090
项目一　重组DNA的常用载体和工具酶 091
必备知识 091
一、常用的分子克隆载体 091
二、分子克隆使用的工具酶 101
技能训练 110
实训7 限制性核酸内切酶酶切 110
实训8 DNA的连接 113
知识小结 114
能力测验 115
项目二　重组DNA的基本步骤 117
必备知识 117
一、目的基因的制备 118
二、选择、构建载体 119
三、连接载体与目的基因 119
四、将重组DNA导入宿主细胞 120
五、重组DNA分子的筛选与鉴定 121
六、外源基因的表达、分离与纯化 122
技能训练 123
实训9 重组质粒DNA分子转入大肠杆菌 123
实训10 蓝白斑法筛选重组菌 125
知识小结 127
能力测验 128

模块四　ELISA技术 129
项目　酶联免疫反应的基本原理和操作 130
必备知识 130
一、ELISA基本原理 130
二、ELISA类型 132
三、ELISA酶与底物 136
四、ELISA操作要点 137
五、ELISA反应条件的选择 142
技能训练 143
实训11 ELISA检测转基因植物及其产品中CP4 EPSPS蛋白 143
知识小结 147
能力测验 148

模块五　蛋白质分离、纯化与分析技术 149
项目　蛋白质的分离与纯化技术 150
必备知识 150
一、蛋白质的理化性质 150
二、蛋白质的分离纯化方法及其原理 151
三、蛋白质的凝胶电泳技术 156
技能训练 164
实训12 聚丙烯酰胺凝胶电泳 164
【知识拓展】　蛋白质印迹技术（Western blotting） 167
一、Western印迹技术的基本原理 167
二、Western印迹技术的基本操作 167
知识小结 172
能力测验 172

参考文献 174