定 价:20 元
丛书名:能力培育型生物学基础课系列实验教材
- 作者:刘箭主编
- 出版时间:2015/1/1
- ISBN:9787030428615
- 出 版 社:科学出版社
适用读者:高等师范院校生命科学专业的本、专科学生及非师范院校相关专业的学生和生命科学工作者
- 中图法分类:Q7-33
- 页码:71
- 纸张:胶版纸
- 版次:3
- 开本:16K
- 字数:(单位:千字)
本书介绍了常用的分子生物学和基因工程实验技术。全书分为三部分,第一部分为基础性实验,介绍了一些简明且独立的实验方案,每个实验可在半日内完成,且成功率高,因此特别适用于有关专业的本科实验教学;第二部分为综合性实验,实验略微复杂,适用于有一定基础的高年级本科生实验教学;最后一部分为研究型实验,为培养学生的独立科研工作能力提供了更加贴近科研工作的实验方案
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《分子生物学及基因工程实验教程(第三版)》:
第一部分 基础性实验
实验1 质粒的分离——碱裂解法
【实验目的】
1.学习碱法分离质粒的基本原理。
2.掌握碱法分离质粒的操作方法。
【实验原理】
质粒是染色体之外裸露的、具有自主复制能力的、以超螺旋状态存在于细胞内的双链DNA 分子。质粒的分离是分子生物学研究中最基本的技术,目前提取质粒的方法很多,比如CsCl梯度离心法、煮沸法、硅石粉法、碱裂解法等。本实验所用的碱裂解法是一种经典的分离质粒DNA 的方法,其基本原理是利用染色体DNA 与质粒DNA 在变性程度和复性速度的差异,即在pH>12的碱性条件下,大肠杆菌的基因组DNA 氢键断裂,双螺旋结构解开而变性,但在该条件下,质粒因其具有共价闭合环状超螺旋结构的特点,两条互补链间的氢键没有完全被破坏,两条链仍然部分地结合在一起;当溶液的pH 回复至中性时,质粒DNA 快速复性,但是染色体DNA 由于分子很大,难以复性;在高盐